产品信息

中文名称：碱性磷酸酶（ALP）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：　碱性磷酸酶（ALP）是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。主要用于骨骼 、肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。

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检测原理

碱性环境中，碱性磷酸酶催化底物生成对硝基酚，通过测定对硝基酚的生成量即可计算出样本中碱性磷酸酶（ALP）活性。

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计算方法

1. 标准曲线绘制：以吸光度值为横坐标，标准品浓度为纵坐标，绘制标准曲线y =kx+ b，x为吸光度值，y为标准品浓度浓度（μg/mL）。根据标准曲线，将ΔA带入公式计算出样本浓度（y，μg/mL）；
2. 血清样本ALP计算
单位定义：每毫升血清每分钟催化产生 1μg 对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：ALP（U/mL）＝y ÷ T
3. 组织、细胞样本ALP计算
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟分催化产生 1μg 对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：ALP（U/mg prot）＝y × V样 ÷ ( V样 × Cpr) ÷ T
(2) 按样本鲜重计算
单位定义：每克组织催化产生 1μg 对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：ALP（U/g）＝y × V样 ÷ ( W × V样 ÷ V样总 ) ÷ T
（3）按照细菌或细胞数量计算
单位定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1μg 对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：ALP（U/104 cell）＝y × V样 ÷ ( 500 × V样 ÷ V样总) ÷ T
V样：加入样本体积，0.05mL；
V样总：加入提取液体积，1 mL；
T：反应时间，30min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞/细菌数，500万；

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注意事项

1. 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测；
2. 试剂二需要密封避光保存。

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