产品信息

中文名称：谷丙转氨酶（GPT/ALT）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：谷丙转氨酶又叫丙氨酸氨基转移酶（EC 2.6.1.2），广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化氨基酸和酮酸转氨基反应，在氨基酸代谢中具有重要作用。此外，哺乳动物肝细胞GPT活性很高，当肝细胞坏死，GPT释放到血液中，血清GPT活性显著增高。因此，GPT被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。

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检测原理

GPT催化丙氨酸和α-酮戊二酸发生转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入2,4-二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在505nm读取吸光值并计算酶活力。

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计算方法

1. 标准曲线的绘制：
以各标准溶液浓度为x轴，以∆A标准为y轴做标准曲线，得到方程y=kx+b。将ΔA 测定带入方程求x值（μmol/mL）。
2. GPT活性计算：
（1）按样本质量计算：
单位定义：每小时每g样本催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GPT活力单位。
GPT活性（U/g 质量）=x×（V样本+V试剂一）÷（W×V样本÷V样总）÷T
（2）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GPT活力单位。
GPT活性（U/mg prot）=x×（V样本+V试剂一）÷（Cpr×V样本）÷T
（3）按血清体积计算：
单位定义：每小时每mL血清样本催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GPT活力单位。
GPT活性（U/mL）=x×（V样本+V试剂一）÷V样本÷T
（4）按细胞或细菌数量计算：
单位定义：每小时每104个细胞或细菌催化产生1μmol丙酮酸的量为一个GPT活力单位。
GPT活性（U/104 cell）=x×（V样本+V试剂一）÷（500×V样本÷V样总）÷T
V样本：样本体积，0.01mL；
V试剂一：试剂一体积，0.04mL；
V样总：提取液体积，1mL；
W：样本质量，g；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
T：反应时间，0.5h；
500：细胞或细菌总数，500万。

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注意事项

1. 样本测试前请选取2个预期差异最大的样本，稀释成不同浓度进行预试，以选取
最佳取样浓度；
2. 若对照孔OD值减去测定孔OD值高于0.4时，可将样本用提取液进行稀释，计算时
乘以相应的稀释倍数即可；若测定孔OD值减去对照孔OD值低于 0.01 时，可以增加样本取样量或者取样浓度。
3. 丙酮酸的标准曲线不同操作条件下，可能存在差异。可以自行按照附录I进行相关检测。

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