产品信息

中文名称：丁酰胆碱酯酶（BchE）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：丁酰胆碱酯酶（Butyrylcholinesterase，BchE，EC3.1.1.8），又称血浆胆碱酯酶，假性胆碱酯酶，是一种丝氨酸水解酶，由肝脏合成后进入血液，几乎存在于所有动物组织中。BchE结构与乙酰胆碱酯酶（AchE）相似，但底物特异性和抑制剂敏感性不同。与AchE相比，BchE能够有效水解较大的胆碱酯，如丁酰胆碱和苯甲酰胆碱，而且可以清除有机磷类农药、氨基甲酸酯类农药等神经毒剂的毒害作用。有研究表明，BchE可作为阿尔茨海默病治疗的重要靶点。

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检测原理

BchE催化丁酰胆碱水解生成胆碱，胆碱与二硫对硝基苯甲酸（DTNB）作用生成5-巯基-硝基苯甲酸（TNB）；TNB在412nm处有吸收峰，通过测定412nm吸光度增加速率，计算BchE活性。

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计算方法

1. 标准曲线绘制：以吸光度值为横坐标，标准品浓度为纵坐标，绘制标准曲线y =kx+ b，x为吸光度值，y为标准品浓度浓度（μg/mL）。根据标准曲线，将ΔA带入公式计算出样本浓度（y，μg/mL）；
2. 血清样本丁酰胆碱酯酶（BchE）计算
单位定义：每毫升血清每分钟催化产生 1μmol 巯基的量为一个活力单位。
计算公式：丁酰胆碱酯酶（BchE）（U/mL）＝y ÷ T
3. 组织、细胞样本ACP计算
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟分催化产生1μmol 巯基的量为一个活力单位。
计算公式：丁酰胆碱酯酶（BchE）（U/mg prot）＝y × V样 ÷ ( V样 × Cpr) ÷ T
(2) 按样本鲜重计算
单位定义：每克组织催化产生 1μmol 巯基的量为一个活力单位。
计算公式：丁酰胆碱酯酶（BchE）（U/g）＝y × V样 ÷ ( W × V样 ÷ V样总 ) ÷ T
（3）按照细菌或细胞数量计算
单位定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生1μmol 巯基的量为一个活力单位。
计算公式：乙酰胆碱酯酶（AchE）（U/104 cell）＝y × V样 ÷ ( 500 × V样 ÷ V样总) ÷ T
V样：加入样本体积，0.02mL；
V样总：加入提取液体积，1 mL；
T：反应时间，10min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞/细菌数，500万；

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注意事项

1. 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测；
2. 测定过程中样本和工作液在冰上放置，以免变性和失活。

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