产品信息

中文名称：D-乳酸脱氢酶（D-LDH）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：乳酸脱氢酶是一种糖酵解酶，主要作用是催化乳酸氧化为丙酮酸，该指标升高可能是疾病的反应。乳酸脱氢酶是诊断心肌梗死，肝脏疾病，血液系统疾病，恶性肿瘤的重要指标。

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检测原理

乳酸脱氢酶（D-LDH）催化NAD+氧化D-乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进一步与2,4-二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。

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计算方法

1. 标准曲线的绘制
根据标准管的浓度（x，mg/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA标准）建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA（y，ΔA）带入公式计算样本浓度（x，mg/mL）。
2. 血清（浆）D-LDH活力的计算
单位的定义：每mL血清（浆）每分钟催化产生1mg丙酮酸定义为一个酶活性单位。
D-LDH 活性（U/mL）= x×V样÷V样÷T
3. 细胞、细菌和组织中L-LDH活力的计算
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1mg丙酮酸定义为一个酶活性单位。
D-LDH 活性（U/mg prot）= x×V样÷（Cpr×V样）÷T
（2）按样本质量计算：
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1mg丙酮酸定义为一个酶活性单位。D-LDH 活性（U/g质量）= x×V样÷（W÷V样总×V样）÷T
（3）按细菌或细胞计算：
单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1mg丙酮酸定义为一个酶活性单位。
D-LDH活性（U/104 cell）= x×V样÷（N÷V样总×V样）÷T
V 样：反应体系中加入的样本体积，10μL=0.01mL；
V 样总：加入的提取液体积，1mL；
T：反应时间，15min；
Cpr：蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
N：细胞或细菌总数，以万计；

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注意事项

1. . ΔA大于1.3或者小于0.01时，建议将样本用蒸馏水稀释或者增大样本量进行实验，注意同步修改计算公式。
2. 为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准）， 确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定。

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