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中文名称:亚铁离子(FRAP)含量检测试剂盒说明书
储存条件:按照标签要求储存
有效期:6个月
检测意义:铁是人体必需的微量元素之一,对于维持机体正常生理功能具有重要作用。亚铁离子是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的重要组成成分,帮助氧的运输,促进脂肪氧化。缺乏铁元素容易造成贫血、代谢紊乱,并影响机体的免疫功能。铁过量是引发或加剧多种慢性病(如糖尿病、心脑血管疾病、神经退化性疾病等)的危险因素。
样本中的Fe2+在酸性条件下与三吡啶基三嗪形成蓝色配合物,在593nm处有吸收峰,通过测定该波长吸光度即可计算Fe2+的含量。
1. 标准曲线的绘制:
根据标准管的浓度(x, μmol/L)和吸光度ΔA标准(y, ΔA标准),建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定(y, ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x, μmol/L)。
2. 计算公式如下:
(1)按血清(浆)等液体体积计算:亚铁离子含量( μmol/L)=x
(2)按样本蛋白浓度计算:亚铁离子含量(μmol/mg prot)=x×10-3×V提取÷(Cpr×V提取)
(3)按样本质量计算:亚铁离子含量(μmol/g 质量)=x×10-3×V提取÷W
(4)按细胞/细菌数量计算:亚铁离子含量(μmol/106 cell)=x×10-3×V提取÷N
V提取:加入提取液的体积;
Cpr:蛋白浓度,mg/mL;
W:样本质量,g;
N;细菌或细胞总数,以106记。
1. 用试剂一稀释得到的标准稀释液容易失效,建议现用现配。
2. 如果测定值吸光度值过低接近空白管,可增加样本量后再进行测定;如果ΔA测定大于1,建议将样本用试剂一稀释后再进行测定。
3. 实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。