产品信息

中文名称：谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：　谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase，GSH-PX）是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢分解的酶。它特异的催化还原型谷胱甘肽（GSH）对过氧化氢的还原反应，可以起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。GSH-PX的活性中心是硒半胱氨酸，硒是 GSH-PX 的必需部分，每克分子酶含4克原子硒。测定GSH-PX的活力可以作为衡量机体硒水平的一项生化指标。

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检测原理

谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）可以促进过氧化氢（H2O2）与还原型谷胱甘肽（GSH）反应生成 H2O 及氧化型谷胱甘肽（GSSG），谷胱甘肽过氧化物酶的活力可用其酶促反应的速度来表示，测定此酶促反应中还原型谷胱甘肽（GSH）的消耗，则可求出酶的活力。

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计算方法

1. 标准曲线绘制：以吸光度值为横坐标，标准品浓度为纵坐标，绘制标准曲线y =kx+ b，x为吸光度值，y为标准品浓度浓度（μg/mL）。根据标准曲线，将ΔA带入公式计算出样本浓度（y，μg/mL）；
2. 血清样本GSH-PX/GPX计算
单位定义：每毫升血清每分钟消耗1nmol GSH的量为一个酶活力单位。
GPX = y × V反总 ÷ V样÷ T
3. 组织、细胞样本GSH-PX/GPX计算
1）按照样本鲜重计算
单位定义：每克组织每分钟消耗1nmol GSH的量为一个酶活力单位。
GPX = y × V反总 ÷(V样÷V样总×W)÷ T
2）按照样本蛋白浓度计算
单位定义：每毫克蛋白每分钟消耗1nmol GSH的量为一个酶活力单位。
GPX = y × V反总 ÷ ( V样 × Cpr ) ÷ T
V反总：反应总体积 0.6mL;
V样：样本取样量 0.025mL；
V样总：提取液体积 1mL;
Cpr: 蛋白浓度 mg/mL;
T：反应时间 10min；

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注意事项

1. 不同样本GPX活性差异较大，选择部分样本进行预实验。根据预实验结果，样本稀释或者加大取样量，计算公式根据实际情况进行修改。
2. 试剂一需现用现配。测定上清液当天提取，当天测试。

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