产品信息

中文名称：谷氨酰胺合成酶（GS）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：谷氨酰胺合成酶（GS）测定对组织和血液检测意义重大。组织中谷氨酰胺合成酶活性水平可反映细胞代谢状态与功能完整性，在肝脏疾病、神经系统疾病等病理进程研究中，有助于剖析组织损伤机制与修复能力；血液谷氨酰胺合成酶测定则能辅助诊断遗传性代谢疾病，监测肝、肾功能异常患者的病情进展及治疗效果，通过动态观察其活性变化，为临床疾病诊断、病情评估及个性化治疗方案制定提供关键参考依据。

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检测原理

GS在ATP和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为γ-谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm处有最大吸收峰，可用分光光度计测定。

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计算方法

1. 血清样本GS计算
单位定义：每毫升样本在每毫升反应体系中每分钟使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
计算公式：GS（U/mL）＝ΔA×V反总÷ V样÷0.005 ÷ T ＝44.44×ΔA
（1）按样本鲜重计算：
单位定义：每g组织在反应体系中每min使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GS（U/g 质量）=ΔA×V反总÷(V样÷V样总×W)÷0.005÷T =44.44×ΔA÷W
（2）按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每mg组织蛋白在反应体系中每min使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
GS（U/mg prot）=ΔA×V反总÷（Cpr×V样）÷0.005÷T = 44.44 × ΔA ÷ Cpr
（3）按样本数量计算
单位定义：每104细胞在每毫升反应体系中每分钟使540nm下吸光值变化0.005定义为一个酶活力单位。
计算公式：GS（U/104 cell）＝ΔA×V反总÷(500 × V样÷ V样总) ÷ 0.005 ÷ T ＝0.09 × ΔA
V反总：反应体系总体积，400μL=0.4mL；
V样：加入样本体积，60μL=0.06mL；
V样总：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，30min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g
500：细胞数量，500万

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注意事项

1. 不同样本活性差异较大，需要先做预实验摸索样本浓度或者取样量。
2. 本反应显色2h较为稳定，在此时间内比色较好。

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