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中文名称:Na+ K+-ATP 酶活性检测试剂盒说明书
储存条件:按照标签要求储存
有效期:6个月
检测意义:ATP 酶可分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,测定无机磷的量可判断 ATP 酶活力的高低。
ATP 酶存在于组织细胞膜及细胞器膜上,是生物膜上的一种蛋白酶,它在物质运送、能量转换以及信息传递方面具有重要的作用。
(1) 按样本鲜重计算:
单位定义:每分钟每克组织消耗 ATP 产生 1μmol无机磷的量为一个 ATP 酶活力单位。
ATP 酶活力(U/g 质量)= C 标×ΔA测定÷ΔA标准×V 总÷(V 样÷V 样总×W)÷T
(2) 按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每分钟每毫克蛋白分解 ATP 产生 1μmol无机磷的量为一个 ATP 酶活力单位。
ATP 酶活力(U/mg prot)= C 标×ΔA测定÷ΔA标准×V 总÷(Cpr×V 样)÷T
(3) 按细菌或细胞数量计算:
单位定义:每分钟每1万个细菌或细胞中ATP 酶分解ATP 产生 1μmol无机磷的量为一个 ATP 酶活力单位。
ATP 酶活力(U/104 cell)= C 标×ΔA测定÷ΔA标准×V 总÷(V 样÷V 样总×500)÷T
C 标:标准管浓度,1μmol/mL;
V 总:酶促反应总体积,0.25mL;
V 样:加入样本体积,0.1mL;
V 样总:加入提取液体积,1mL;
T:反应时间,20min;
Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
W:样本质量,g;
500:细菌或细胞总数,500 万。
实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。