产品信息

中文名称：丙酮酸激酶（PK）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：丙酮酸激酶广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是产生ATP的关键酶之一，也是糖酵解过程中的主要限速酶之一。

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检测原理

丙酮酸激酶使磷酸烯醇式丙酮酸和ADP变为ATP和丙酮酸，丙酮酸再由乳酸脱氢酶转化为乳酸，进一步催化NADH生成 NAD+。

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计算方法

(1) 按样本鲜重计算：
单位定义： 每克组织每分钟消耗1nmolNADH 为一个酶活力单位。
PK（U/g 鲜重）=[△A×V 反总÷（ε×d）×109]÷（V 样÷V 样总×W）÷T
(2) 按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每毫克蛋白每分钟消耗1nmolNADH 为一个酶活力单位。
PK（U/mg prot）=[△A×V 反总÷（ε×d）×109]÷（V 样×Cpr）÷T
(3) 按样本体积计算：
单位定义：每毫升样本每分钟消耗1nmolNADH 为一个酶活力单位。
PK（U/mL）=[△A×V 反总÷（ε×d）×109]÷ V 样÷T
V反总：反应体系总体积，2×10-4 L；
ε：NADH摩尔消光系数，6.22×10-3L/mol/cm；
d：比色皿光径，1cm；
V样：加入样本体积，0.02mL；
V样总：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，5min；
109：单位换算系数，1mol=109nmol；
W：样本质量，g；

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注意事项

实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

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