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中文名称:多酚氧化酶(PPO)检测试剂盒说明书
储存条件:按照标签要求储存
有效期:6个月
检测意义:多酚氧化酶是自然界中分布极广的一种含铜氧化酶。普遍存在于植物、真菌、昆虫的质体中。植物受到机械损伤和病菌侵染后,多酚氧化酶催化酚形成醌,使组织形成褐变,与食品加工与保藏工艺具有非常重要的意义。
多酚氧化酶催化邻苯二酚氧化生成有色物质,其在波长410nm处有吸收峰,测定吸光值的变化可计算出多酚氧化酶活性。
1. 血清样本PPO计算
单位定义:每毫升样本在每毫升反应体系中每分钟 A410 变化0.005为一个酶活力单位。
计算公式:PPO(U/mL)=ΔA×V反总÷ V样 ÷0.005 ÷ T =120 × ΔA÷W
2. 组织、细胞样本PPO计算
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义:每毫克组织蛋白在每毫升反应体系中每分钟 A410 变化0.005为一个酶活力单位。
计算公式:PPO(U/mg prot)=ΔA×V反总÷(V样×Cpr)÷0.005÷T =120 × ΔA÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
单位定义:每克组织在每毫升反应体系中每分钟 A410 变化 0.005 为一个酶活力单位。
计算公式:PPO(U/g)=ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总) ÷ 0.005÷T =120 ×ΔA÷W
(3)按样本数量计算
单位定义:每104细胞在每毫升反应体系中每分钟 A410 变化 0.005 为一个酶活力单位。
计算公式:PPO(U/104 cell)=ΔA×V反总÷(500× V样÷V样总) ÷0.005 ÷ T =0.24 × ΔA÷W
V反总:反应体系总体积,0.3mL;
V样:加入样本体积,0.05mL;
V样总:加入提取液体积,1 mL;
T:反应时间,10 min;
Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
W:样本质量 g;
500:细胞数量,500万