产品信息

中文名称：超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：超氧化物歧化酶(SOD)广泛存在于动物，植物，微生物和培养细胞中，是活性氧清除系统中发挥重要作用的抗氧化酶。SOD歧化超氧物阴离子自由基生成过氧化氢和分子氧。在保护细胞免受氧化损伤过程中具有十分重要的作用。

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检测原理

利用黄嘌呤氧化酶（XO）催化产生的超氧阴离子(·O2-)与WST-8反应产生水溶性的甲臜染料，通过测量产物的吸光度来间接测定SOD活性，后者在450nm 处有吸收；SOD可清除超氧阴离子，从而抑制了甲臜的形成；反应液颜色越深，说明SOD活性愈低，反之活性越高。

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计算方法

SOD 酶活性单位： 在上述黄嘌呤氧化酶偶联反应体系中抑制百分率为 50%时，反应体系中的SOD酶活力定义为一个酶活力单位。
抑制百分率＝ ((A对照孔-A对照空白孔)－(A测定孔-A测定空白孔) ) ÷ (A对照孔-A对照空白孔)× 100%
1. 血清样本SOD计算
计算公式：
SOD（U/mL）＝抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率) × V反总 ÷ V样=10 × 抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率)
2. 组织、细胞样本SOD计算
(1) 按样本蛋白浓度计算
计算公式：
SOD（U/mg prot）＝抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率) × V反总 ÷ (V样 × Cpr) =10 × 抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率) ÷ Cpr
(2) 按样本鲜重计算
计算公式：
SOD（U/g）＝抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率)×V反总÷(W×V样÷V样总) =10 × 抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率) ÷ W
（3）按照细菌或细胞数量计算
计算公式：
SOD（U/104cell）＝抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率)×V反总÷(500×V样÷V样总) =0.02×抑制百分率 ÷ (1－抑制百分率)
V反总：反应体系总体积，0.2mL；
V样：加入样本体积，0.02mL；
V样总：加入提取液体积，1 mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞/细菌数，500万；
W：样本称重，g

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注意事项

1. 样本测试前请选取2个预期差异最大的样本，稀释成不同浓度进行预试，以选取最佳取样浓度；如果计算出来的抑制百分率小于30%或大于70%，则通常需要把该样品重新测定。尽量使样品的抑制百分率在30-70%范围内。如果测定出来的抑制百分率偏高，则需适当稀释样品；如果测定出来的抑制百分率偏低，则需重新准备浓度较高的待测样品。
2. 准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70ºC冻存，但建议尽量当天完成测定。
3. 试剂二可能会存在部分沉淀析出，使用前需要充分混匀，可超声加速溶解。

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