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中文名称:海藻糖含量检测试剂盒说明书
储存条件:按照标签要求储存
有效期:6个月
检测意义:海藻糖存在于大量有机体中,包括细菌、藻类、酵母、植物、昆虫和其他无脊椎动物。由于海藻糖具有独特的不同于其他碳水化合物的生物学特性,能在干旱、高温、脱水、冷冻、高渗透压及毒性物质等恶劣环境下保护生物体细胞蛋白质、脂肪、糖类、核酸等组分不受损害。
测定方法采用蒽酮比色法。具有灵敏度高﹑简便快捷﹑适用于微量样本的测定等优点。但是蒽酮比色法也存在一定缺陷,如果样本中含有可溶性糖,则会影响测定。本试剂盒建议用于除海藻糖外不含其他可溶性糖样本的测定。
1. 标准曲线的绘制:
根据标准管的浓度(x,mg/mL)和吸光度ΔA标准(y,ΔA 标准),建立标准曲线。将ΔA测定(y,ΔA测定)带入公式计算样本浓度(x,mg/mL)。
2. 按血清(浆)等液体体积计算:
海藻糖含量(mg/mL)=(V1× x ) ÷ ( V3 × V 1÷ V2 ) = 10 x
3. 按样本蛋白浓度计算:
海藻糖含量(mg/mg prot)=V1 × x ÷ ( V1 × Cpr)= x ÷ Cpr
4. 按样本质量计算:
海藻糖含量(mg/g 质量)= V1 × x ÷ (W × V1 ÷ V2 )= x ÷ W
5. 按细胞/细菌数量计算:
海藻糖含量(mg/104 cell)=(V1 × x )÷ ( 500 × V1 ÷ V2 ) =x÷500
V1:加入反应体系中样本体积,0.05mL;V2:提取液总体积,1mL;V3:加入血清(浆)体积,0.1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细菌或细胞总数,500 万。
1. 为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准), 确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定。
2. 如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。计算时注意同步修改计算公式。