产品信息

中文名称：胰蛋白酶活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：胰蛋白酶（Trypsin，EC 3.4.4.4）选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链，是一种重要的消化酶。此外，胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。

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检测原理

胰蛋白酶可以水解碱性氨基酸的羧基所生成的肽键、酰胺键和酯键。根据胰蛋白酶水解酰胺键的性质设置底物，且底物与其产物对405nm波长的光基本不吸收，因此本实验测定光波的波长设定在405nm上，记录吸光度的变化。

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计算方法

1. 组织、细胞样本胰蛋白酶计算
(1) 按样本质量计算：
单位定义： 每克组织每分钟消耗1μmol 对硝基苯胺为一个酶活力单位。
胰蛋白酶（nmol/min/g 鲜重）=[△A×V 反总÷（ε×d）×106]÷（V 样÷V 样总×W）÷T
(2) 按样本蛋白浓度计算：
单位定义：每毫克蛋白每分钟消耗1μmol 对硝基苯胺 为一个酶活力单位。
胰蛋白酶（nmol/min/mg prot）=[△A×V 反总÷（ε×d）×106]÷（V 样×Cpr）÷T
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；
ε：NADH摩尔消光系数，9.87×103L/mol/cm；
d：比色皿光径，1cm；
V样：加入样本体积，0.01mL；
V样总：加入提取液体积，1mL；
T：反应时间，2min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
106：单位换算系数，1mol=106μmol；
W：样本质量，g；

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注意事项

实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

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