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中文名称:黄嘌呤氧化酶(XOD)活性检测试剂盒说明书
储存条件:按照标签要求储存
有效期:6个月
检测意义:黄嘌呤氧化酶(XOD)是一种重要的酶类,参与嘌呤代谢的过程。XOD主要分布于哺乳动物的心、肺、肝脏等组织中,当肝脏功能受损时,XOD大量释放到血清中,对肝脏的诊断具有特异性的意义。
XOD催化次黄嘌呤产生黄嘌呤和超氧阴离子,超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酰胺和萘乙二胺盐酸盐的作用下,生成紫红色的偶氮化合物,在530nm有特征吸收峰,根据其生成量可反映XOD活性的大小。
1. 标准曲线的绘制
根据标准管的浓度和吸光度ΔA标准建立标准曲线。根据标准曲线,将ΔA测定带入公式计算样本浓度(y,μmol/mL)。
2. 血清(浆)XOD活力的计算:
酶活定义:每毫升样本每分钟催化产生1nmol NO2- 定义为一个酶活力单位。
XOD活性(U/mL)= y × 103 ÷ T = 50 × y
3. 细胞、细菌和组织中LDH 活力的计算
(1)按样本蛋白浓度计算:
酶活定义:每毫克组织蛋白每分钟催化产生1nmol NO2- 定义为一个酶活单位。
XOD活性(U/mg prot) = y × 103 ÷ Cpr ÷ T = 50 × y ÷ Cpr
(2)按样本质量计算:
酶活定义:每克组织每分钟催化产生1nmol NO2- 定义为一个酶活单位。
XOD活性(U/g 质量 ) = y × V提取× 103 ÷ W ÷ T = 50 × y ÷ W
(3)、按细菌或细胞数量计算:
酶活定义:每万个细胞每分钟催化产生1nmol NO2- 定义为一个酶活力单位。
XOD活性(U/104 cell)= y × V提取 × 103 ÷ 500 ÷ T = 0.1 × y
103:单位换算系数,1μmol/mL=103nmol/mL;
T:反应时间,20min;
W:样本质量,g;
V提取:提取液体积,1mL;
Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;
500:细胞或细菌总数,500万;
∆A样本在0.005-1之间数据有效,数值过大或过小,可以增加样本量或稀释样本,注意同步修改公式。