产品信息

中文名称：α-淀粉酶（α-AL）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)可随机地作用于淀粉中的 α-1,4-糖苷键，生成葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖、糊精等还原糖，同时使淀粉的粘度降低，因此又称为液化酶。

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检测原理

淀粉水解酶催化淀粉水解生成还原糖，还原糖还原3,5-二硝基水杨酸生成棕红色物质，在540nm有吸收峰；通过测定540nm 吸光度增加速率，计算淀粉酶活性。

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计算方法

1. 标准曲线的制备：以吸光度值为横坐标，标准品浓度为纵坐标，绘制标准曲线。将ΔA测定带入标准曲线计算y（mg/mL）。
2. 血清样本α-AL计算
单位定义：每毫升血清每分钟催化产生1 mg 还原糖定义为1个酶活力单位。
计算公式：α-AL（U/mL）＝ y × V样 ÷ V样 ÷ T ＝0.1 × y
3. 组织、细胞样本α-AL计算
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟催化产生1 mg 还原糖定义为1个酶活力单位。
计算公式：
α-AL（U/mg prot）＝y × V样÷ ( V样 × Cpr) ÷ T ＝0.1 × y ÷ Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟催化产生1 mg 还原糖定义为1个酶活力单位。
计算公式：
α-AL（U/g）＝y × V样÷ ( W × V样 ÷ V样总 ) ÷ T ＝0.1 × y ÷ W
（3）按照细菌或细胞数量计算
单位定义：每1百万个细菌或细胞每分钟催化产生1 mg 还原糖定义为1个酶活力单位。
计算公式：
α-AL（U/106 cell）＝y × V样 ÷ ( 5 × V样 ÷ V样总) ÷ T＝0.02 × y
V样：加入样本体积，0.1mL；
V样总：加入提取液体积，1 mL；
T：反应时间，10min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
5：细胞/细菌数，500万；
W:样本重量，g

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注意事项

1. 测定的吸光值大于1时，可以对样本进行适当稀释后测定。若吸光值过小，可以浓增加样本取样量或者提取浓度。
2. 若试剂一有黄色晶体析出，需加热溶解后再用。

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