产品信息

中文名称：α-葡萄糖苷酶(AG)测试盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：植物α-葡萄糖苷酶参与糖代谢、生长发育及逆境响应等关键生理过程。通过测定其活性，可以研究植物在种子萌发、果实成熟等阶段的能量供应机制，评估植物的抗逆能力，并为优化农业生产、食品加工及生物能源开发提供重要依据。

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检测原理

底物在α-葡萄苷糖酶作用下水解，释放出游离的对硝基酚。加入碱性溶液停止反应，并使对硝基酚显色。在400nm处测吸光度，可计算酶活力单位。

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计算方法

1. 标准曲线绘制：
以吸光度值为横坐标，标准品浓度为纵坐标，绘制标准曲线y =kx+ b，x为吸光度值，y为标准品浓度浓度（μg/mL）。根据标准曲线，将ΔA带入公式计算出样本浓度（y，μg/mL）；
2. α-葡萄糖苷酶活性：
(1) 血清（浆）AG活力的计算
单位的定义：每mL血清（浆）每小时催化产生1μg对硝基酚的量为一个酶活性单位。
计算公式：AG 活性（U/mL）= y ×V样÷V样÷T=2y
（2）按样本蛋白浓度计算
单位定义：每毫克蛋白每小时催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：AG（U/mg prot）＝y × V样 ÷ ( V样×Cpr ) ÷ T ＝2y ÷ Cpr
（3）按样本鲜重计算
单位定义：每克组织每小时催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：AG（U/g）＝y × V样 ÷ ( W × V样 ÷ V样总 ) ÷ T ＝2y ÷ W
（4）按细菌或细胞计算
单位定义：每1万个细菌或细胞每小时催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：AG（U/104 cell）＝y × V样 ÷ ( 500 × V样 ÷ V样总 ) ÷ T ＝0.004y
T：反应时间，0.5h；
V样：加入样本体积，0.01mL；
V样总：加入提取液体积，1 mL；
W：样本质量，g。
Cpr：蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞数量，500万

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注意事项

1. 比色时，溶液呈现淡黄色，在2h内保持稳定。
2. 不同植物样本的α-葡萄糖苷酶差异较大，根据样本活性可以适当增加或者减少称取样本重量，也可增加反应时间。
3. 实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

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