产品信息

中文名称：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）属于糖基水解酶家族，可以从含有阿拉伯糖残基的多聚物如阿拉伯木聚糖、阿拉伯聚糖和阿拉伯半乳聚糖等的非还原末端水解生成一个L-阿拉伯糖分子。该酶在半纤维素降解以及果实的成熟软化过程中有着重要作用。

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检测原理

α-L-Af 分解对硝基苯基-α-L-阿拉伯呋喃糖苷生成对-硝基苯酚，对-硝基苯酚在400 nm 处有最大吸收峰，通过测定400 nm 处吸光值变化可计算得α-L-Af 活性。

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计算方法

1. 标准曲线绘制：
以吸光度值为横坐标，标准品浓度为纵坐标，绘制标准曲线y =kx+ b，x为吸光度值，y为标准品浓度浓度（μg/mL）。根据标准曲线，将ΔA测定带入公式计算出样本浓度（y，μg/mL）；
2. 血清样本α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）计算：
单位定义：每毫升血清每分钟催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）（U/mL）＝y ÷ T
3. 组织、细胞样本α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）计算：
(1)按样本蛋白浓度计算 ：
单位定义：每毫克组织蛋白每分钟分催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）（U/mg prot）＝y × V样 ÷ ( V样 × Cpr) ÷ T
(2)按样本鲜重计算 ：
单位定义：每克组织每分钟催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）（U/g）＝y × V样 ÷ ( W × V样 ÷ V样总 ) ÷ T
(3)按照细菌或细胞数量计算 ：
单位定义：每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1μg对硝基酚的量为一个活力单位。
计算公式：α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶（α-L-Af）（U/104 cell）＝y × V样 ÷ ( 500 × V样 ÷ V样总) ÷ T
V样：加入样本体积，0.01mL；
V样总：加入提取液体积，1 mL；
T：反应时间，15min；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
500：细胞/细菌数，500万；

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注意事项

1. 实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测；
2. 试剂二需要密封避光保存。

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