产品信息

中文名称：植酸酶活性检测试剂盒说明书

储存条件：按照标签要求储存

有效期：6个月

检测意义：植酸酶（Phytase）又叫肌醇六磷酸酶，是一种蛋白质和糖的结合酶，植酸酶可以分解植酸产生无机磷和肌醇，极大的提高生物对养分的利用率，天然植酸酶广泛存在于植物、动物组织和微生物中，现多用微生物来合成植酸酶进行生产应用，植酸酶在粮食生产、畜牧养殖领域具有广泛的研究价值。

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检测原理

在一定的环境条件下，植酸酶可以分解植酸钠（肌醇六磷酸十二钠）产生无机磷和肌醇衍生物，在酸性条件下，无机磷和钼酸铵显色剂发生反应，产生蓝色的钼蓝物质，其在 700nm 有特征吸收峰，通过测定无机磷的含量，可计算出植酸酶的活性。

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计算方法

1. 标准曲线的绘制：
根据标准管的浓度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA标准（y，ΔA 标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA测定代入公式计算样本浓度（x，μmol/mL）。
2. 按血清（浆）等液体体积计算：
酶活定义：在37℃，pH5.5 环境下，每mL样本每分钟在反应体系释放1μmol 无机磷为1个酶活力单位。
植酸酶活性（U/mL）= x×V样÷V样÷T=x÷30
3. 按样本蛋白浓度计算：
酶活定义：在37℃，pH5.5 环境下，每mg组织蛋白每分钟在反应体系释放1μmol 无机磷为1个酶活力单位。
植酸酶活性（U/mg prot）= x×V样总÷（Cpr×V样总）÷T= x÷Cpr÷30
4. 按样本质量计算：
酶活定义：在37℃，pH5.5环境下，每g组织每分钟在反应体系释放1μmol无机磷为1个酶活力单位。
植酸酶活性（U/g 质量）= x×V 样总÷W÷T = x÷W÷30
5. 按细胞/细菌数量计算：
酶活定义：在37℃，pH5.5环境下，每104个细胞每分钟在反应体系释放1μmol无机磷为1个酶活力单位。
植酸酶活性（U/104 cell）= x×V 样总÷N÷T = x÷N÷30
V 样：加入样本体积，0.05mL；
V 样总：提取液体积，1mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；
W：样本质量，g；
T：反应时间，30min；
N：细胞数量，以万计。

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注意事项

1. 为防止沸水浴10min 过程中水分散失，建议使用螺旋口EP管或用封口膜给EP管缠口。
2. 如果测定吸光值过低或接近空白，适当延长第二步的37℃水浴反应时间或加大样本量后，重新测定。如果 A测定大于1.5 或者ΔA超过检测范围，建议将样本用蒸馏水适当稀释后进行测定。注意同步修改计算公式。
3. 结果于40min内测定完毕。

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