Bradford蛋白浓度测定试剂盒

产品信息

一、测定意义

Bradford蛋白浓度测定试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)是根据最常用的两种蛋白浓度检测方法之一Bradford法研制而成，实现了蛋白浓度测定的快速、稳定和高灵敏度，并且检测数据有很好的线性关系。

二、测定原理

本试剂盒检测原理是考马斯亮蓝(Coommassie Brilliant Blue)G-250与蛋白质的碱性和芳香族氨基酸特别是精氨酸(Arginine)在酸性介质中结合后，溶液转变为蓝色，溶液最大吸收峰从465nm迁移到595nm，颜色的变化与蛋白质浓度成正比。

本试剂盒检测速度极快，10-20个样品只需不足10分钟即可完成，和BCA法相比大大缩短了检测时间。

本试剂盒检测灵敏度高，最小蛋白检测量达到0.5μg。

本试剂盒标准曲线的线性关系好。常规的Bradford法的标准曲线是非线性的。本试剂盒进行了精心优化，确保5μl体积的样品或标准品在0.1-1.5mg/ml浓度范围内有良好的线性关系(参考图1)。

图1. 本试剂盒蛋白标准曲线的实测效果图。图中数据仅供参考，实际的检测效果可能会略有不同。

与测定蛋白浓度的其它方法如BCA法和Lowry相比，Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，尤其是还原试剂的影响。样品中β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)的浓度可高达1M，二硫苏糖醇(DTT)的浓度可高达5mM。但本试剂盒受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20、60、80低于0.015%。含去垢剂的样品推荐使用本公司生产的Bradford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型)(PKNA7-4-Q800)或本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒(PKNA7-2-Q5000, PKNA7-2-Q500, PKNA7-2-Q200, PKNA7-1-Q5000, PKNA7-1-Q500, PKNA7-1-Q200)。

每个试剂盒可以检测 1000 个样品。

三、包装清单

保存条件： 4ºC保存，一年有效。蛋白标准可以-20ºC长期保存。

四、注意事项

1、蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

2、将G250染色液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。

3、需可检测560-610nm之间波长的酶标仪一台，最佳检测波长为595nm。并需96孔板。

4、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

五、使用说明

1、蛋白标准的准备

a.  蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用0.9%NaCl、PBS或水稀释标准品。蛋白标准(5mg/ml BSA)如果冻存，请完全融化并混匀后使用。

b.  按照下表配制0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml蛋白标准。每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置0.0625mg/ml的蛋白标准。

2. 蛋白浓度测定：

a. 取5µl不同浓度蛋白标准加到96孔板的蛋白标准孔中。

b. 取5µl样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足5µl，需加标准品稀释液补足到5µl。请注意记录样品体积。

c. 各孔加入250µl G250染色液。

d. 用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度，也可以在2小时内测定，2小时内检

测数据无显著变化。

e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。

六、相关产品

1.  Bradford蛋白浓度测定试剂盒(1000T)

2.  Braford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) （800T）

3.  蛋白标准(5mg/ml BSA)（1ml）

4.  BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) （5000T）

5.  BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) （500T）

6.  BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) （200T）

7.  BCA蛋白浓度测定试剂盒（5000T）

8.  BCA蛋白浓度测定试剂盒（500T）

9.  BCA蛋白浓度测定试剂盒（200T）

七、公司介绍

陌凡生物科技有限公司是一家专业从事转基因检测、食品安全以及动植物疫病检测为核心业务的生物科技公司。能够为客户提供动植物疫病检测试剂、小分子抗原抗体、植物激素、植物抗体、重组蛋白等优质产品。自主研发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的各种试剂盒。产品覆盖面广，品质可靠。