产品信息
产品货号 |
产品名称 |
包装规格 |
测定方法 |
PKNA7-1-Q5000 |
BCA蛋白浓度测定试剂盒 |
5000T |
BCA |
一、测定意义
BCA蛋白浓度测定试剂盒(BCA Protein Assay Kit)是根据目前世界上最常用的两种蛋白浓度检测方法之一BCA法研制而成,实现了蛋白浓度测定的简单、高稳定性、高灵敏度和高兼容性。
灵敏度高,检测浓度下限达到25µg/ml,最小检测蛋白量达到0.5µg,待测样品体积为1-20µl。
在50-2000µg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
二、测定原理
BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响,可以兼容样品中高达5%的SDS,5%的Triton X-100,5%的Tween20、60、80。但本试剂盒受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响,需确保EDTA低于10mM,无EGTA,二硫苏糖醇(DTT)低于1mM,β-巯基乙醇(β-Mercaptoethanol)低于0.01%。
不适用BCA法时建议试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(PKNA7-3-Q1000)。
每个试剂盒可以检测5000个样品。
三、包装清单
产品编号 |
产品名称 |
包装 |
PKNA7-1-Q5000-1 |
BCA试剂 A |
500ml×2 |
PKNA7-1-Q5000-2 |
BCA试剂 B |
30ml |
PKNA7-1-Q5000-3 |
蛋白标准(BSA) |
30mg×2 |
PKNA7-1-Q5000-4 |
蛋白标准配制液 |
5ml |
— |
说明书 |
1份 |
保存条件:室温保存。蛋白标准配制成溶液后-20ºC冻存。
四、注意事项
1、需酶标仪一台,测定波长为540-595nm之间,562nm最佳。需96孔板。如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但测定时,需根据比色皿的最小检测体积,适当加大BCA工作液的用量使不小于最小检测体积,样品和标准品的用量可相应按比例放大也可不变。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
2、如发现样品稀释液或裂解液本身就有较高背景,请试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒(PKNA7-3-Q1000)
3、为了加快BCA法测定蛋白浓度的速度可以适当用微波炉加热,但是切勿过热。
4、EDTA浓度必须小于10mM,不兼容EGTA。不适用BCA法时,Bradford蛋白浓度测定试剂盒(PKNA7-3-Q1000)
5、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
五、使用说明
1.蛋白标准品的准备
a. 取1.2ml蛋白标准配制液加入到一管蛋白标准(30mg BSA)中,充分溶解后配制成25mg/ml的蛋白标准溶液。配制后可立即使用,也可以-20ºC长期保存。
b. 取适量25mg/ml蛋白标准,稀释至终浓度为0.5mg/ml。例如取20µl 25mg/ml蛋白标准,加入980µl稀释液即可配制成0.5mg/ml蛋白标准。蛋白样品在什么溶液中,标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见,也可以用0.9% NaCl或PBS稀释标准品。稀释后的0.5mg/ml蛋白标准可以-20ºC长期保存。
2.BCA工作液的配制
根据样品数量,按50体积BCA试剂A加1体积BCA试剂B(50:1)配制适量BCA工作液,充分混匀。例如5ml BCA试剂A加100µlBCA试剂B,混匀,配制成5.1ml BCA工作液。BCA工作液室温24小时内稳定。
3.蛋白浓度检测:
a. 将标准品按0、1、2、4、8、12、16、20µl加到96孔板的标准品孔中,加标准品稀释液补足到20µl,相当于标准品浓度分别为0、0.025、0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/ml。
b. 加适当体积样品到96孔板的样品孔中。如果样品不足20µl,需加标准品稀释液补足到20µl。请注意记录样品体积。
c. 各孔加入200µl
BCA工作液,37ºC放置20-30分钟。
注: 也可以室温放置2小时,或60ºC放置30分钟。BCA法测定蛋白浓度时,颜色会随着时间的延长不断加深。并且显色反
应会因温度升高而加快。如果浓度较低,适合在较高温度孵育,或适当延长孵育时间。
d. 用酶标仪测定A562,或540-595nm之间的其他波长的吸光度。
e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品的蛋白浓度。
六、相关产品
1. Bradford蛋白浓度测定试剂盒(1000T)
2. Braford蛋白浓度测定试剂盒(去垢剂兼容型) (800T)
3. 蛋白标准(5mg/ml
BSA)(1ml)
4. BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (5000T)
5. BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (500T)
6. BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型) (200T)
7. BCA蛋白浓度测定试剂盒(5000T)
8. BCA蛋白浓度测定试剂盒(500T)
9. BCA蛋白浓度测定试剂盒(200T)
七、公司介绍
陌凡生物科技有限公司是一家专业从事转基因检测、食品安全以及动植物疫病检测为核心业务的生物科技公司。能够为客户提供动植物疫病检测试剂、小分子抗原抗体、植物激素、植物抗体、重组蛋白等优质产品。自主研发了涵盖分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物医学等领域的各种试剂盒。产品覆盖面广,品质可靠。