1、如何选择试剂盒?

A、查阅相关文献。看看文献中是否有你所研究材料中测定该指标的报道。如果有，那么就可以选购该试剂盒。

B、从基本代谢的角度考虑。如果是基本代谢的相关指标，即使没有相关报道，你也可以选购该试剂盒。

C、注意测定自备用品，尤其是仪器设备。请咨询公司销售人员，详细了解所需仪器设备。如果不具备相关仪器设备，那么不能选购该试 剂盒

2、生化检测试剂盒和ELISA检测有什么异同？

3、生化检测的检测原理

生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应，其反应过程可以划分为四个区：延迟区、等速区、过渡区和平衡区，以时间为横坐 标、吸光度为纵坐标作图，如下所示：

延迟区：无规律可寻。

等速区：对应的是速率法，一般应用于酶类项目，可以使用因数法来计算待测浓度。

过渡区：对应的是固定时间法，目的是解决某些化学反应的非特异性问题，提高准确度。

平衡区：对应的是终点法，主要是测定某物质在样本中的含量。利用某物质与显色剂反应后，生成的物质与原来的颜色有区别，在某一波长下，吸光度的强弱与物质的含量呈正比关系，进而计算出该物质含量水平。

4、有哪些仪器可以进行生化检测试剂盒检测？

5、试剂盒的说明书上表明是用酶标仪进行检测，可否换成分光光度计法？

不可以，分光光度计法和酶标仪法的测定体系不同、灵敏度也不一样。因此计算结果的时候，计算方法和公式也是不一样的，不能随便改变 检测方法，否则会影响实验结果数据的准确性。

6、常量法和微量法试剂盒能否通用?

同一指标的常量法与微量法试剂盒不可以通用，因为两者测定体系不同。如果用户自行改变，公司不能保证测定质量。

7、生化试剂盒样本检测的一般要求？

A、样本处理完之后尽快进行检测，且实验过程中，样本尽量保存放置在冰上。

B、样本值应在试剂盒的线性范围内，如果超过试剂盒的检测范围上限，样本需要稀释处理；如果低于试剂盒检测的下限值，样本需要进一步浓度以提高浓度。

C、取完样短时间内不能立即检测，需要将样本保存在-80度。

8、检测过程中发现平行的复孔，数值差异比较大，是什么原因？

需要排除操作的因素，比如加样和加液手法不正确，体系中样本和试剂混合不均匀，样本提取时离心不完全等等。

9、是否可以检测冻存的样本？

通常新鲜样本和冻存样本都可用于大多数生化指标的测定，但最好还是采用新鲜样本，因为根据指标的不同，样本的冻存对结果的影响也不同。一般情况下，随着冻存时间的延长，样本的酶活力会逐渐下降，甚至会完全失活。而某些指标中，冻存样本的检测结果会比新鲜样本检测结果高。组织匀浆样本最好当天检测，若不能当天检测，这种情况推荐直接冻存组织，而不是组织匀浆。样本切忌反复冻融，建议收集样本之后，分装冻存，避免样本反复冻融。

10、试剂盒应该在多长时间内用完?

A、为了保证测定质量，试剂盒开封后一般应该在一个月内用完。

B、用户样品量大时，可以一次订购，分批生产和发货。

C、特别值得注意的是，出于试剂稳定性考虑，说明书特别标明现配现用的试剂，配制后应该短时间内用完(如2小时)，绝对不可以过夜。

D、为了用户方便，公司通常分装成几个试剂瓶中，用户可以根据实际测定需要，进行配制。强烈建议用户在样品提取后，准备测定前，再现配现用，防止因为等待时间过长，导致试剂状态变化，造成测定结果不可靠。

11、按照说明书冷藏后出现沉淀的试剂还可以用吗?

可以。但是应该在常温中充分溶解后再用，以免试剂浓度变小，造成测定不可靠。

12、试剂变色后还可以用吗?

不可以。建议用户注意避光保存，使用前一定要观察试剂颜色是否正常。

13、可以改变说明书中加试剂顺序吗?

绝对不可以，否则可能造成反应不能正常进行，导致测定失败。强烈建议加完试剂后立即混匀。

14、用户可以自行进行哪些调整?

A、原则上用户必须严格按照说明书进行规范操作，尤其是反应体系中各试剂体积和加入顺序以及测定步骤，才能保证测定结果可靠。

B、样品质量：提取液体积比，用户可以根据预测定结果自行调整，测定结果偏低，可以适当加大上述比值，测定结果偏高，可以适当减小上述比值。但是同一批样品测定应该保持同样的上述比值。

C、反应时间，用户可以根据预测定结果自行调整，原则是吸光度变化必须保持线性。吸光度变化偏小，可以适当延长反应时间：吸光度变化偏大，可以适当缩短反应时间。但是，同一批样品测定应该保持同样的反应时间。

D、数据的单位，用户可以根据数据大小和习惯表达方式，进行适当调整，包括摩尔单位、时间单位和质量单位等，通常应该保证数据在小数点前三位和小数点后三位。

E、同一研究的一批指标，应该调整为同样的单位，从而可以进行比较，便于分析。例如，物质浓度应该都用摩尔系列的单位，酶活性都用摩尔浓度/单位毫克蛋白质/单位时间，等等。

15、为什么△A会接近于零?

表明反应不能发生。

A、如果是测定酶活性，表明样品几乎没有酶活性：如果是测定某种物质，则表明该样品几乎不含有此种物质。

B、体系中还发生了别的反应，该反应的底物或者产物在该波长下也有光吸收，并且变化方向相反，几乎抵消了希望的酶反应，可以通过设置新的对照排除。

C、样品保存不当。这就需要用户自己仔细检查样品处理、采集和保存以及提取状况。

D、试剂盒质量问题。可以换一种完全不同的样品来验证，比如去室外随机采取某种正常的叶片来测定。如果同样没有活性，那表明试剂盒质量问题的可能性很大。请及时与我司工作人员联系。

16、为什么△A会出现负值?

A、可逆反应造成。可以通过适当缩短反应时间来防止逆反应的发生。

B、体系中发生了别的反应。该反应的底物或者产物在该波长下也有光吸收，并且变化方向相反，超过了希望发生的反应，同样可以通过设置新的对照排除。

C、反应体系中存在颗粒或者气泡。随着时间延长，颗粒沉淀或者气泡破裂，会导致吸光度显著下降，出现负值。主要注意观察，即可发现是否属于这种情况。颗粒通常来源于样品粗提液，可以提供再次离心，确保得到澄清的上清液:当然也可能来自试剂，测定前观察试剂中是否有沉淀，如果有，一方面待充分溶解后再用，另一方面待颗粒沉淀下来后小心吸取上清液。气泡通常来源于反应本身，可以通过降低反应速度(如减少样品质量提取液体积比)来防止气泡产生。

17、为什么不显色?

A、前处理不当，例如测定酶活性，酶已经失活，包括样品保存条件不当、使用了导致酶失活的化学试剂和提取方法不当等。

B、试剂盒保存不当，导致试剂盒中某些试剂失活。

C、该样品确实不含有该成分。

18、测定管与对照管为什么会没有差异，甚至低于对照管?

A、如果空白值有点偏高，空白管存在一定的污染情况。

B、测定与对照结果几乎没有差异:首先样本具体是什么，是否样本自身的含量偏低；再者就是提取步骤，是否按照说明书操作步骤进行，提取的充分程度，如果提取不充分也会导致结果偏低情况。可以考虑将样本取样量加大。

19、为什么同一样品的平行测定结果差异大?

A、可能是样本中色素造成反应体系不均匀、测定指标提取时离心不完全，杂质影响等原因造成。

B、系统误差较大，主要与测定仪器的稳定性和操作的精确性有关。，建议进行同-提取液的3次重复测定，看看它们之间的差异，如果差异大，表明系统误差大，必须等待仪器稳定(通常需要开机半小时以上仪器才能够稳定)，同时多练习操作，以达到一致。当保证系统误差很小后，再开始正式测定。

20、为什么不同样品测定值差异不显著?

A、该指标在不同样品间确实无变化。

B、操作重复性不好，掩盖了组内和组间差异。后者可以看重复之间吸光度变化的重复性，如果重复之间吸光度变化相差很大，表明主要可能是操作不规范造成的，尤其是加液体积不准确和反应时间控制不准确。